PESQUISA CIENTIFICA DOS PRODUTOS PITTY INIBIDOR BIOFILME
PRINCIPIO ATIVO QUE UTILIZAMOS EM NOSSA LINHA DE PRODUTOS
DESINFETANTE A BASE DE TRIAZINA COMO INIBIDOR DE BIOFILME PRODUZIDO
POR Salmonella Typhimurium E Salmonella Choleraesuis ISOLADOS DE SUÍNOS
NASCIMENTO, J. F. 1, SERPA, R. 1, RECK, C. 2, TOVO, R.3, STINGELIN, G.M.4, MENIN, A. 1*
1*Universidade Federal de Santa Catarina, Laboratório de Controle de Doenças dos Animais – CDA/UFSC, Rodovia Ulysses Gaboardi, km 3, CEP: 89520-000, Curitibanos/SC, email: alvaro.menin@ufsc.br. 2VERTÁ – Laboratório de Diagnóstico Veterinário. 3 Médico Veterinário Sanitarista. 4 Farmabase Saúde Animal.
PALAVRAS CHAVE: suinocultura, doenças dos suínos, sanitizantes.
INTRODUÇÃO: As principais medidas de higiene e segurança sanitária na produção animal são baseadas nas diretrizes do Código Zoosanitário Internacional. Dada a importância da higienização dos ambientes de abate e manipulação dos produtos de origem animal, o Código alerta sobre a precária variedade de desinfetantes universais disponíveis no mercado, juntamente com a necessidade de ter um controle efetivo sobre a atividade biocida dos produtos existentes. Para que seja comprovada a eficácia do produto, é necessária a avaliação do mesmo levando em consideração a espécie do microrganismo de interesse e a concentração do produto recomendado pelo fabricante (1). Deste modo, o objetivo do presente estudo foi avaliar a atividade de um desinfetante a base de triazina, sobre a produção de biofilmes de Salmonella Typhimurium e Salmonella Choleraesuis, isolados de suínos com a forma entérica e septicêmica.
MATERIAL E MÉTODOS Este experimento foi realizado no Laboratório de Controle de Doenças Animais - CDA, da Universidade Federal de Santa Catarina, Campus Curitibanos. Obtenção e manutenção dos isolados: Os isolados de Salmonella Typhimurium (n=4) e Salmonella Choleraesuis (n=4) foram obtidos a partir de casos clínicos da infecção (forma entérica e septicêmica) em suínos da fase de terminação. Atividade inibitória: Os biofilmes foram formados em placas de microtitulação de 96 cavidades. A triazina testada foi a Hexahidro 1, 3, 5 Tris (2-hidroxietil) na concentração comercial de 2%, associada a tensoativos. A triazina foi diluída na proporção 1:100 em caldo BHI (Brain Heart Infusion) estéril, em condições assépticas, conforme indicação do fabricante. Alíquotas do caldo BHI contendo a triazina foram adicionadas aos poços. Os inóculos foram ajustados para 5x108 UFC/mL e adicionados aos poços já contendo o caldo BHI. As placas foram incubadas por até 48h a 37°C. Duas placas distintas foram montadas, e as análises foram realizadas em 24h e 48h. Leitura dos biofilmes: Passado o período de incubação, o sobrenadante dos biofilmes foi removido e os poços foram lavados com água destilada estéril. Os biofilmes foram desidratados com metanol, durante 15 minutos. Após a secagem do metanol, o biofilme foi corado com cristal violeta a 1%, durante 5 minutos. Após a retirada do cristal violeta, os poços foram lavados com água destilada estéril, até remoção completa do cristal violeta não aderido. Após a secagem, o cristal violeta foi removido dos biofilmes com a adição de ácido acético 33% e a leitura da densidade ótica realizada em espectrofotômetro a 570 nm. Os experimentos foram realizados em triplicatas. Como controle negativo foi utilizado BHI estéril e BHI estéril com desinfetante a base de derivado de triazina. Já os controles positivos foram realizados somente com inóculo, sem a da molécula desinfetante.
RESULTADOS E DISCUSSÃO Os resultados mostraram que o desinfetante a base de triazina (hexahidro 1, 3, 5 Tris (2-hidroxietil)) reduziu a produção de biofilmes de Salmonella Typhimurium em 92%, nas primeiras 24h de exposição Figura 1. Para Salmonella Choleraesuis, a redução da formação de biofilmes foi ainda mais expressiva, com diminuição de 95% da biomassa dos biofilmes produzidos em 24h, e de 97% da biomassa produzida em 48h de cultivo Figura 1. A formação de biofilmes bacterianos confere aos microrganismos a habilidade de sobreviver à dessecação, além de proteger os microrganismos de agentes químicos, como os desinfetantes utilizados na higienização dos ambientes (2). Sanitizantes que tenham a habilidade de destruir biofilmes formados são de grande importância no controle destes microrganismos. Entretanto, agentes que são capazes de prevenir a formação de biofilmes acumulam uma vantagem econômica em relação a outros sanitizantes, de modo que, podem ser utilizados não só no controle, como também na prevenção da formação de biofilmes, que estão associados ao aumento da resistência e a persistência de microrganismos no ambiente (3).
CONCLUSÕES O desinfetante a base de triazina (hexahidro 1, 3, 5 Tris (2-hidroxietil)) foi eficiente na inibição da formação de biofilmes produzidos por Salmonella Typhimurium e Salmonella Choleraesuis. Estudos adicionais serão conduzidos para análise da formação de biofilmes em um maior número de isolados, incluindo outros agentes infecciosos, e em diferentes condições ambientais de formação de biofilmes.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS 1. DOMINGUES, P.F.; LANGONI, H. Manejo Sanitário animal. Rio de Janeiro: EPUB. 2001. P. 210 2. MULCAHY, H.; CHARRON-MAZENOD, L.; LEWENZA, S. Extracellular DNA chelates cations 385 and induces antibiotic resistance in Pseudomonas aeruginosa biofilms. PLoS Pathogens 5, 2008. 3. OLIVEIRA, M.M.M.; BRUGNERA, D.F.; PICCOLI, R.H. Biofilmes microbianos na indústria de alimentos: uma revisão. Rev Inst Adolfo Lutz. V.69, n.3:277-84, 2010.
Figura 1: Atividade inibitória de um desinfetante a base de triazina (hexahidro 1, 3, 5 Tris (2-hidroxietil)) na formação de biofilmes de Salmonella Typhimurium (n=4) e Salmonella Choleraesuis (n=4) em 24 e 48 horas de exposição. Os dados expressam a produção de biofilme com base na Densidade Ótica (DO), com média ± desvio da média (SEM). Barras fechadas mostram formação do biofilme sob tratamento e as barras abertas mostram controle positivo (sem a presença do desinfetante).
Os produtos Pitty Concentrado e Pitty Multiação
são usado na higiênização hospitalar e ambientes
onde é necessario ter a maxima proteção:
Pitty Concentrado Bactericida, atua e mata:
Actinobacilus pleuropneumoniae
Bordetella bronchiseptica
Clostridium perfringens
Enterococcus faecalis
Escherichia coli
Mycobacterium smegmatis
Pasteurella multocida
Proteus sp.
Pseudomonas aeroginosa
Salmonella Cholerasuis
Salmonella Typhimurium
Salmonella Enteritidis
Staphylococcus aureus
Streptococcus suis
Pitty Concentrado fungicida, atua e mata:
Aspergillus flavus
Aspergillus fumigatus
Aspergillus niger
Aspergillus sp.
Candida albicans
Malassezia sp.
Pitty Concentrado Esporicida, atua e mata:
Clostridium sordelli
Clostridium chauvoei
Clostridium haemolyticum
Aspergillus flavus
Aspergillus fumigatus
Aspergillus niger
Pitty Concetrado Viricida, atua e mata:,
Gumboro
Newcastle
Marek (UFP)
Cinomose
Gripe suina
Gripe aviária
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